Otomatik fraksiyon toplayıcı ile adacık perfüzyonu – LAMBDA OMNICOLL

Pankreas adacıkları patofizyolojisinde önemli bir rol oynadığı düşünülmektedir. Tip 1 ve Tip 2 diyabet Pankreas adacıklarındaki β hücrelerinin kan şekerini düzenlemek için yeterli miktarda insülin salgılayamaması nedeniyle.

Pankreas adacıklarındaki β-hücre kalitesinin kesin ölçütü, β-hücre fonksiyonunun ölçülmesidir; yani, adacıkların ortamdaki glikoz seviyelerindeki küçük değişikliklere yanıt olarak insülini kontrollü bir şekilde salgılayabilme yeteneğidir.

İn vitro ortamda β-hücre kinetiğini anlamak için perfüzyon sistemlerinin kullanımı, adacık fizyolojisi ve patofizyolojisinin aydınlatılmasında kilit bir faktör olmuştur. Adacık perfüzyonu şunları içerir: Adacıkların besin maddeleri, gaz veya reaktiflerle sürekli akışa maruz kalması. Çeşitli araştırmacılar, perfüzyon sıvısının sıcaklığını, pH'ını ve akış hızını kontrol edebilen perfüzyon sistemleri yayınladılar.

Şu anda herhangi bir laboratuvarda kolayca tekrarlanabilen, standartlaştırılmış, ucuz bir cihaz ve protokol bulunmamaktadır.

O adacık perfüzyon kurulumu şunlardan oluşur dört perfüzyon kolonu Dört kanallı Isamtec pompalarına bağlı olarak, 4 farklı perfüzyon solüsyonunu aynı anda 4 paralel adacık içeren kolona pompalamak için kullanılır. 100 µL/dakika akış hızı. Glukoz ve salgılatıcı maddeler içeren çözeltinin adacıklar içinden sürekli akışı veya dinamik perfüzyonu, in vitro ortamda düzenlenmiş insülin salınımının en doğru değerlendirme yöntemidir.

LAMBDA OMNICOLL otomatik çok kanallı fraksiyon toplayıcı ile analog sinyalli herhangi bir üçüncü taraf peristaltik pompa kullanılabilir.

Adacıkları barındıran kolonlar ve perfüzyon ortamı 37 °C'de tutuldu. Sıcaklık kontrollü bir odada. Adacıkların uygun şekilde maruz kalmasını ve salgı ürünlerinin toplanmasını sağlamak için, her bir uyarı için 10-15 dakika süreyle adacıklara perfüzyon uygulandı.

4 kolondan gelen perifüzatlar (100 μL/min), otomatik bir sistem tarafından her dakika eş zamanlı olarak toplandı. 4 kanallı fraksiyon toplayıcı LAMBDA OMNICOLL ile 96 kuyucuklu plakalara aktarım.. LAMBDA OMNICOLL 4 kanallı numune toplayıcı, 96 kuyucuklu plakanın en üstteki 4 kuyucuğunu her dakika seçer. (A, B, C ve D - her biri farklı bir tedavi koşulunu temsil eder) 12 dakika boyunca kesirleri toplayın ve ardından en alttaki dört satıra geçin. (E, F, G ve H satırları) 96 kuyucuklu plakanın.

96 kuyucuklu toplama plakalarındaki perfüzyon sıvısı, analiz edilen maddelerin bütünlüğünü korumak için <4 °C'nin altında tutuldu.

LAMBDA OMNICOLL çok kanallı fraksiyon toplayıcı tabanları (perifüzat örneklerini içeren) soğuk banyoya veya herhangi bir başka ısıya dayanıklı kaba yerleştirilebilir.

Toplanan perfüzyon sıvısı örnekleri, aşağıdaki amaçlarla analiz edildi: insülin, glukagon veya somatostatin konsantrasyonu. Farklı hormonların ölçümü, aynı 96 kuyucuklu plakanın farklı kuyucuklarında yapılabilir.
Prensip olarak, 96 örnekten çoklu adacık hazırlıkları Farklı deneysel koşullar altında eş zamanlı ölçümler yapılabilmesi, yüksek verimli tarama olanağı sağlar.

ADACIK PERİFÜZYONU: LAMBDA OMNICOLL ile otomatik çok kanallı fraksiyon toplama

PANKREAS ADACIKLARI

ADALAR PERİFÜZYONU

96 kuyucuklu plakalar için yapılandırılmış LAMBDA OMNICOLL ile otomatik çok kanallı fraksiyon toplama