利用柱色谱法和馏分收集器分离和鉴定化感化合物 LAMBDA OMNICOLL

化感化合物的分离、结构鉴定和化学合成 从植物、真菌和其他微生物中鉴定高效生物结构是一项非常耗时耗力的研究。然而，鉴定高效生物结构却至关重要。 （可用作天然除草剂、药物、抗氧化剂等） 值得花费时间和精力。.

即使经过几个初步步骤对粗提物进行分级分离，如果仍无法在粗提物中鉴定出结构，那么对化感物质结构进行常规分析的研究就会变得困难。 （例如，通过浸渍、超声波或微波辅助萃取，然后进行水相双相萃取等方法）.

研究人员随后将接触到大量溶剂，其中可能含有部分混合物的结构。 （具有或不具有类似的生物活性）. 生物活性 这些结构可以通过以下方式识别： 生物指导研究和检测. 如此大量的溶剂应该使用溶剂混合物分成较小的份量。 不同极性. 收集馏分有助于分离出具有所需/目标生物活性的最具活性的化感分子。.

大多数情况下， 硅胶液相柱色谱法 用于提取物的分级分离。然而，通常的做法是分级分离并收集约 65 - 200 分, 为了实现 每个洗脱液中最纯净的生物活性结构. 由于市场上分光光度馏分收集器价格昂贵，因此人工收集大量馏分是一般研究项目中耗时耗力的阶段。.

进一步的纯化步骤包括 薄层色谱法、生物活性测定、制备柱色谱法 等等，最后，列出一份清单 光谱分析 对于高活性结构，以便将来阐明并实现其化学合成。.

这 收集 200 个或更多分数可以轻松实现自动化。 以最可行的方式 （如果合适） 馏分收集器 被选中了！）.

粗提物的分级分离

首先，通过以下方法将粗提物分离成各种离散的组分，这些组分包含极性相似或分子大小相近的化合物： 柱色谱法. 在这种色谱分离中，大约 收集了 65 份体积均为 20 mL 的馏分。 （基于时间） 馏分收集器 OMNICOL。.

薄层色谱法（TLC）

将所有收集的馏分取等分试样，点样于活化硅胶薄层色谱板（20 x 20 cm）。根据馏分的组成进行合并。 斑点模式和射频值 在薄层色谱板上。合并的馏分编号为（Fr.1 - Fr.8）。.

制备型薄层色谱或高效液相色谱柱色谱

馏分（Fr.1 - Fr.8）可通过以下方法进一步纯化： 制备型薄层色谱和/或高效液相色谱柱色谱. 制备型高效液相色谱法有助于更准确地分离特定化合物。.

化感化合物的表征

然后利用分离得到的纯组分来确定其结构，并再次检验其生物活性。.

采用高分辨率光谱法对纯化感物质进行表征。 红外光谱、质谱、, ¹手 ¹³碳谱 光谱。.

红外光谱用于确定分离得到的纯组分的官能团。液相色谱-质谱联用（LC-MS）可提供经验分子量或精确分子量（高分辨质谱HRMS），而核磁共振（NMR）谱图则揭示碳氢化合物的化学环境。LC-MS分析有助于比较质谱图谱。.