Пример настройки автоматического сбора фракций.
Например, полный организация колоночной хроматографии с автоматическим сбором Элюат, полученный с использованием коллектора фракций OMNICOLL, включает в себя:
- Два похожих контейнера с Элюционные буферы А и В соединены сифоном. (или трубка внизу с клапаном для регулировки потока)
- Элюционный буфер А постоянно втягивается в стакан с Элюционный буфер B который постоянно перемешивается магнитной мешалкой, таким образом изменение его буферной концентрации
- Программируемый перистальтический насос LAMBDA для прокачать градиентную смесь в колонку
- Элюат из колонки проходит через детектор (для измерения pH, поглощения при 280 нм, проводимости)
- С детектора, фракционирование белков собирается коллектор фракций OMNICOLL в необходимые емкости (например, пробирки, флаконы и т. д.)
Белки элюируются путем изменения состава буфера. (ионная сила, pH, электропроводность, концентрация солей и т. д.). Условия элюции можно изменять, выбирая линейный, ступенчатый или сегментированный ступенчатый режимы. изменение потока буфера А в В при этом состав подвижной фазы изменяется со временем.
Градиентная элюция и профиль элюции
Градиентное элюирование подразумевает изменение состава подвижной фазы в процессе разделения образцов для достижения оптимального разделения за минимальное время.
Различный состав элюента (градиентное элюирование) может влиять на коэффициент удерживания и, следовательно, на коэффициент емкости.
Профили градиента:
Как правило, предпочтительнее использовать линейные градиенты; их можно реализовать в линейные, сегментированные, выпуклые и вогнутые формы. Нелинейные градиенты обладают рядом существенных преимуществ, включая сокращение времени разделения, улучшение разрешения образца и повышение чувствительности обнаружения.
